如何进行订单询价?
目录肽或者定制肽询价,请通过邮件(info@Rienden.com)、电话(+86 0371 60906819)将以下信息提供给我们:
目录肽:目录编号和需求重量
定制肽多肽序列、修饰、质量、纯度(Crude, Desalted, >75%, >80%, >90%, >95%, >98%)等信息
如何进行下单?
如需下单,请将订单信息和付款信息通过邮件(info@Rienden.com)或者电话(+86 0371 60906819)告诉我们,你也可以在线提交相关信息。
你们都提供哪些质量控制信息?
我们所有产品均进行分子量和纯度检测,多肽纯度通常是通过高效液相色谱进行检测,发货时我们提供COA报告和相关检测报告,样品的颜色、外观、质量等信息也包含在COA中。我们也可以根据您的要求定制多肽检测项目。
多肽合成周期通常多久?
根据多肽长度、纯度、质量和难度不同,订单周期会有差异,少于30个常规氨基酸的小量多肽,通常合成周期2-3周,对于短肽和纯度要求较低的多肽,生产周期短至数天,我们在收到您的项目要求后会对订单周期进行科学评估。
不同纯度多肽应用有哪些?
常规如下: 1、多肽纯度> 85%:免疫学应用,多克隆抗体生产和非敏感筛选。 2、多肽纯度> 90%:结构-活性关系和生物测定。 3、多肽纯度> 95%:ELISA,酶学和生物学相关的活性。 4、多肽纯度> 98%:结构研究/结晶学,核磁共振和敏感生物测定。
多肽纯度和多肽净含量的区别是什么?
多肽纯度是使用高效液相色谱测量多肽在UV 210-220nm处吸光度,利用面积归一法得到的。通过该方法获得的纯度值不包括存在于冻干物质中的水和三氟乙酸盐,因为它们在210-220nm处不具有UV吸光度
如何选择合适的多肽纯度?
我们为不同的应用提供不同纯度的定制多肽,从粗品到98%。以下是选择定制肽纯度的一般指导原则。
Crude to <75%:非敏感性筛选测定。 (建议脱盐至75%)。
> 75%:免疫应用,多克隆抗体生成ELISA标准用于测量抗体滴度亲和层析肽阵列生产
> 85%:免疫应用、非定量酶底物研究、磷酸化测定、非定量肽阻断研究与树脂偶联以获得亲和力纯化用于细胞附着的组织培养板的涂层蛋白质电泳应用
> 95%:定量受体-配体相互作用、体外生物测定、体内研究、定量阻断和竞争性抑制测定、定量磷酸化研究、NMR研究、物理性质标准结构研究、酶学研究、单克隆抗体生产
> 98%:SAR研究临床试验、API(活性药物成分)、商业产品、X射线晶体学研究
多肽是如何生产出来的?
多肽通常是使用固相合成法和液相合成法合成,大部分多肽是使用的固相合成法合成的,合成后的粗品经过纯化、冻干、检测等步骤完成生产。下图是我们多肽生产的流程和质量控制。
合成多肽中的非多肽杂质有哪些?
合成多肽主要含有两种非肽类杂质:二硫苏糖醇(DTT)和三氟乙酸。DTT对细胞有毒性,如果使用定制多肽进行细胞培养研究,大多数细胞耐受DTT水平低于1M,对于粗品肽,DTT的残留可以忽略不计。使用含有少量TFA溶剂纯化的大多数多肽,在冻干48小时后能够除去,但TFA盐难以单独用冻干步骤除去。如果TFA对实验结果有影响,在下订单时需要注明脱TFA盐或者转为其他盐(盐酸盐等)。
如何保存冻干的多肽?
保存多肽的小瓶要始终密封,在实验前仔细进行设计,尽量减少冻干多肽的反复取用。短期储存(小于3个月),建议在-20°C冻存。如果需要更长时间的储存,我们建议将多肽储存在-80°C的冰箱中。对于冻干多肽和多肽溶液都要避免样品反复冻融。如果需要频繁或者定期取用多肽,建议将样品分成若干等份,每次取用需要的样品。含有C、M或W的多肽在空气中易于氧化,建议抽真空后使用氮气或者氩气保护。通常多肽溶液在4°C下能稳定储存一周,但是如果多肽序列中有不稳定性结构(例如:含有C、M、W或DG、DP结构),最好在不使用时将溶液冷冻,PH大于8条件下多肽溶液在不使用时也需要冻存。
如果进行多肽溶解?
多肽的溶解对于每个使用多肽的研究者来说都是个挑战,由于每种氨基酸都具有独特的性质,因此每个多肽对溶解方法都有独特的要求。在缓冲盐溶液中溶解多肽:酸性多肽溶解在碱性缓冲液中,碱性多肽溶解在酸性缓冲液中,如果需要可短暂超声处理。含有Trp、Met、Cys的多肽需要特别注意避免氧化。通常多肽溶液在4°C可以保存一周,但是如果多肽序列具有不稳定结构(例如:含有C、M、W、N、Q或DG、DP结构),在不适用时需要将溶液冻存。PH大于8的多肽溶液在不使用时也需要冻存。含有Trp、Met、Cys、Asn、Gln的大多数肽具有有限的保存期限,不建议长期存放。
如何估算多肽的静电荷?
下面概述步骤以一种通过氨基酸序列确定溶剂的一种方法,多肽溶解前最好先做小试。碱性氨基酸残基和N末端NH2赋值+1,酸性氨基酸和C末端COOH赋值-1,计算多肽的总体电荷。如果多肽总电荷为正值,多肽为碱性肽,首先可以尝试用去离子水溶解,如果多肽不溶,可以尝试使用10%或者更高浓度的乙酸溶液溶解,如果多肽仍然不溶,加入TFA(<50μl)助溶,将样品用水稀释到1ml。如果多肽的总电荷为负值,多肽为酸性肽,首先可以尝试用去离子水溶解,如果多肽不溶,加入NH4OH(<50μl)助溶,将样品用水稀释到1ml。如果多肽的总电荷为零,多肽为中性肽,在溶解时可能需要加入有机溶剂,例如:乙腈、甲醇、异丙醇,也可能需要加入变性剂,例如尿素和盐酸胍。
如果多肽纯度为90%, 剩余的10%时什么?
如果多肽的纯度为90%,另外10%含有少氨基酸残基的短肽、截短肽、没有完全脱保护的多肽序列、在多肽裂解中的副反应多肽。
如果进行多肽设计?
多肽的C端和N端可以根据多肽在蛋白质中的位置来设计,如果多肽在蛋白质的内部,多肽两端不应带电荷,定制多肽需要进行N端乙酰化和C端酰胺化修饰。如果多肽序列在蛋白的C末端或者N末端,根据蛋白的C端或者N端进行修饰设计。
KLH和BSA作为载体蛋白特性差异是什么?
KLH和BSA都是载体蛋白,BSA的分子量币KLH小,BSA溶解性好且具有免疫原性,它含有59个赖氨酸,30-35个伯胺能够和缀合位点反应,他是流行的弱抗原性化合物载体。BSA可用于许多免疫实验,例如ELISA,免疫轨迹。BSA由于在一些免疫检测实验中作为阻断剂而限制了它的使用,KLH使用的多一些。
贵公司可以合成多长的肽
通常情况下,我们合成的多肽在3-50个氨基酸,我们也可以合成二肽和长度超过100个氨基酸的序列。对于较短序列的多肽,在合成裂解和纯化冻干时可能会有问题。
我需要进行氨基酸序列分析吗?
固相合成多肽时在受控条件下进行的,我们有严格的操作和管理规范,多肽检测通常是使用质谱分析测定多肽的分子量从而证明多肽合成的完成。
什么是聚乙二醇化,如何使用它?
聚乙二醇是多肽和蛋白药物的有用递送系统,聚乙二醇化是多肽通过化学键和PEG连在一起。研究表明,当PEG连接到多肽中时,多肽的生物利用度较裸肽增加,药物多肽的治疗效果改善,减少副作用。